色谱分离是有机化学中常用的分离方法色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,把它叫做流动相。
色谱分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
色谱分离中所使用的的吸附剂有硅胶,氧化铝,聚酰胺,硅藻土等。而硅胶吸附剂是色谱中常用的吸附剂。化学式xSiO2·yH2O。透明或乳白色粒状固体。具有开放的多孔结构,吸附性强,能吸附多种物质。影响硅胶吸附能力的主要有比表面,孔径,孔容等,硅胶根据其孔径的大小分为:大孔硅胶、粗孔硅胶、B型硅胶、细孔硅胶。由于孔隙结构的不同,因此它们的吸附性能各有特点。粗孔硅胶在相对湿度高的情况下有较高的吸附量,细孔硅胶则在相对湿度较低的情况下吸咐量高于粗孔硅胶,而B型硅胶由于孔结构介于粗、细孔之间,其吸附量也介于粗、细孔之间。
硅胶的应用:
薄层层析硅胶板,柱层析硅胶,层析制备板以及球形硅胶填料等。国内通用硅胶一般指的是粗孔硅胶,常用于有机化合物的分离,而蛋白化合物一般常用大孔硅胶,液相等会用到球形硅胶或者反相硅胶等。